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華南師大劉彥梅研究員團隊在《Nature Communications》發(fā)表基因編輯領(lǐng)域重要進展

來源:華南師范大學(xué)      2022-06-20
導(dǎo)讀:近日,華南師范大學(xué)腦科學(xué)與康復(fù)醫(yī)學(xué)研究院青年拔尖人才劉彥梅與青年英才秦偉、生命科學(xué)學(xué)院青年英才梁芳、廣東省人民醫(yī)院費繼鋒教授合作,在基因編輯領(lǐng)域取得了重要進展。該研究通過純化蛋白并結(jié)合化學(xué)修飾gRNA的方法優(yōu)化了SpCas9新變體SpG和SpRY在斑馬魚基因組的應(yīng)用,并生成了SpRY介導(dǎo)的胞嘧啶堿基編輯器SpRY-CBE4max和腺嘌呤堿基編輯器zSpRY-ABE8e,突破了PAM的限制,實現(xiàn)了一些以前無法觸及的疾病相關(guān)遺傳變異,顯著提高了CRISPR-Cas在斑馬魚基因組中的靶向性。相關(guān)成果以“SpG and SpRY variants expand the CRISPR toolbox for genome editing in zebrafish”為題于6月14日發(fā)表在《Nature Communications》上。

在該研究中,研究團隊首先通過純化含有 bpNLS 的蛋白質(zhì)和 MS 修飾的 gRNA,使得SpG和SpRY變體在斑馬魚基因組中可以有效地靶向幾乎所有PAM 的位點。之后,研究團隊借助SpRY無PAM限制的特性,又構(gòu)建了可以靶向單堿基的單堿基編輯工具SpRY-CBE4max 和 zSpRY-ABE8e。通過大量的位點驗證,脫靶率分析以及產(chǎn)物純度分析等,證實這些工具可以有效地編輯以前工具無法編輯的位點,并利用這些工具成功構(gòu)建了2種新的斑馬魚疾病模型。這些新開發(fā)的基因編輯工具將促進斑馬魚模型在揭示基因功能、生理機制以及疾病發(fā)病機制和治療中的應(yīng)用。

我校梁芳為論文第一作者,秦偉和劉彥梅為本論文的共同通訊作者,我校為第一完成單位。該研究得到了國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學(xué)基金、廣東省重點領(lǐng)域研究發(fā)展計劃及廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟動物病原生物學(xué)與流行病學(xué)重點實驗室研究基金的支持。

原文鏈接:https://www.nature.com/articles/s41467-022-31034-8#ref-CR37

參考資料:https://news.scnu.edu.cn/51721




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